ПЦР тест на коронавирус назначается пациентам с явными признаками заболевания.
Почему "ошибаются" ПЦР-тесты - эксперт
Что такое ПЦР-тест, и для чего его сдают. ПЦР – это тест, позволяющий определить или исключить наличие конкретной инфекции у пациента, то есть исследование представляет собой этиологическую диагностику патогенного возбудителя. Например, тест на полимеразную цепную реакцию (ПЦР) более чувствителен, чем экспресс-тесты на антигены, которые вы можете провести дома. Положительный результат такого теста требует обязательной проверки методом ПЦР (полимеразной цепной реакции). Молекулярное тестирование, включая тестирование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), выявляет генетический материал вируса и, таким образом, может определить, инфицирован ли человек SARS-CoV-2 в настоящее время.
Диагностика методом ПЦР: современный подход выявления инфекционных и генетических заболеваний
Это позволит инфекции набрать необходимую критическую массу на 1 мл для более простого обнаружения патогена; как берут соскоб из уретры. Первым делом обрабатывают раствором NaCl 0. Затем, совершая циркулярные движения, зонд проводят на 2-4 см в уретру. Головку зонда, которая имеет щетинистое строение отсекают и кладут в пробирку со специальным раствором своеобразный питательный агар для бактерий ; из влагалища производят мазок. Предварительно убирают секрет бартолиновых желез , затем из заднего нижнего свода влагалища специальной ватной палочкой происходит забор материала. При видимых патологических изменениях во влагалище мазок следует брать непосредственно на поврежденном участке; как проводят соскоб из цервикального канала у женщин.
Удалив слизь из наружных половых путей, зонд на 0,5 — 1,5 см вводят в шейку матки, совершают циркулярное движение и, не касаясь стенок влагалища, удаляют зонд из половых путей. Затем совершают действия, аналогичные соскобу из уретры; из ротоглотки забор происходит натощак. Придерживая кончик языка, зондом производят мазок с задней стенки глотки, по миндалинам или по небным дужкам. Не соприкасаясь со слизистой ротовой полости и зубами, зонд выводится и отправляется на пцр-исследование; из конъюнктивы, предварительно очистив физиологическим раствором гнойные выделения, производят соскоб слизистой нижнего века от латерального к медиальному краю. Веко при этом придерживается медицинским работником во избежание соприкосновения зонда со слизистой глаза и ресницами.
Для сохранения нервной системы как своей, так и сотрудников медицинского учреждения, следует правильно подготовиться к исследованию. Подготовка к ПЦР у мужчин Перед исследованием ПЦР мужчинам следует помнить, чего делать нельзя: мочиться за 3 часа до исследования; производить спринцевание и стерильную обработку члена; мыть член мылом, содержащим антибиотик; заниматься сексом за двое суток до ПЦР на ИППП; Подготовка к ПЦР в гинекологии Женщинам перед тем как сдать мазок на ПЦР запрещено: при соскобе из уретры запрещено мочиться за 3 часа до исследования; использовать вагинальные растворы с дезинфицирующими свойствами; за двое суток до исследования применять суппозитории для влагалища; использовать антибиотики местно, в том числе и мыло с антибиотиком; занятия сексом за 48 часов до исследования; применять антибиотик внутрь влагалища и уретры; спринцеваться; принимать антибиотики. После последнего приема антибактериального препарата должно пройти не менее 4 недель; сдавать ПЦР во время менструации. Общие сведения при исследовании мочи для мужчин и женщин Следует сдать на анализ первую мочу утром, ее среднюю порцию. Другими словами начинать мочиться следует в унитаз.
Затем остановить акт мочеиспускания, подставить под уретру баночку для сбора мочи, продолжить мочиться в течении 2-3 секунд, затем снова остановить мочеиспускание и, убрав контейнер, закончить акт мочеиспускания в унитаз.
И процент таких ложноотрицательных результатов очень высок, - говорит завкафедрой вирусологии Российской медицинской академии непрерывного профессионального образования Елена Малинникова. Однако и этого недостаточно, ведь каждый день промедления влияет на исход лечения. А тут еще вирусная нагрузка".
Развиваются симптомы, приводящие к ухудшению трудоспособности: выраженная слабость, головные боли, ухудшение психического состояния.
Поскольку дальше начинаются необратимые изменения в органах и системах. Болезнь не удается взять под контроль, обеспечить продолжительную жизнь пациенту также невозможно. ПЦР назначается для раннего выявления патологического процесса. Генетические аномалии Любого типа. Потому методика представляет такую ценность для диагностики наследственных аномалий. Способ не до конца освоен, потому считается перспективным.
Как уже было сказано, с помощью методики можно установить отцовство. Используется отдельная модификация анализа. Подготовка к исследованию Меры зависят от того, какой биоматериал будут брать. Вот некоторые варианты: Моча Изучение урины требуется, когда проводят диагностику мочеполовых инфекций, поражений венерического плана у мужчин и женщин. У первых методика применяется не всегда. Часто ее заменяют забором соскоба из уретры. Перед проведением обследования, накануне запрещена гигиена репродуктивных органов. Анализ сдают в течение суток с момента подозрительного полового акта.
Но это не строгое требование, а скорее рекомендация по раннему выявлению патологического процесса. Кровь Также ее отдельные компоненты: сыворотка и пр. Забирают для определения гепатитов разных форм, дифференциальной диагностики патологий печени, выявления герпеса, СПИДа, также при обследовании на предмет генетических аномалий. Особых правил подготовки в этом случае нет. Кровь сдают натощак, это единственное требование к пациенту. Мокрота Отделяемое слизистой оболочки дыхательных путей. Исследуется для диагностики респираторных патологий, пневмонии, бронхита, определения источника процесса. Также в рамках выявления других поражений: будь то легочные формы микоплазмоза или прочие.
Специальная подготовка не требуется. Биоптат Биологический материал слизистой оболочки пищевода и желудка. Используется для диагностики причин язвы, гастрита и прочих патологий этой области. Например, таким способом удается надежно обнаружить хеликобактер, который чаще всего и оказывается виновником патологических процессов. Подготовки опять же не нужно. Соскобы со слизистых оболочек Используются особенно часто. В основном, в рамках выявления венерических заболеваний, коронавируса. Но не только.
Достаточно временно ограничить гигиену половых органов или полости рта, чтобы не смыть следы патогенной флоры, вирусов. Другие биологические жидкости Будь то ликвор, секрет предстательной железы и прочие. По показаниям. Подготовка будет специфической. Вопрос стоит уточнить у лечащего врача.
Еще через трое суток лишь пятая часть результатов была ложной, а далее вероятность правдивости теста начала падать. Через три недели после начала заражения две трети проверок дали отрицательный результат.
Таким образом, это может быть оптимальным временем для тестирования, если цель — минимизировать ложноотрицательные результаты», — сообщили авторы исследования. Конечно, далеко не все больные точно знают, когда подхватили вирус, зато назвать момент первых признаков недомогания может почти каждый. Впрочем, сами авторы подчеркивают, что вероятность получить ложный ответ есть в любой день.
Чем ПЦР отличается от антител и какой анализ россиянам нужно сдавать при подозрении на ковид?
Такие праймеры присоединяются к ДНК возбудителя в пробе и под действием катализаторов многократно воспроизводят свои дубли. Этот процесс называются «репликация» — многократное увеличение, дублирование искомого участка до тех пор, пока он не станет доступен для определения. Процесс репликации возможен только при наличии в пробе ДНК возбудителя. Преимущества метода ПЦР Высокая специфичность. Метод ПЦР определяет заданную последовательность нуклеотидов, присущую конкретному патогену. Исключен риск ложноположительных результатов. Для ПЦР достаточно всего несколько молекул ДНК патогена или даже уже неактивных — разрушенных вирусных частиц, сохранивших специфические участки ДНК в достаточном количестве , чтобы он был обнаружен в ходе исследования. Скорость проведения. Лаборатория получает результат ПЦР-теста через несколько часов, клиент — уже на следующий день. Скорость диагностики имеет принципиально важное значение для своевременного лечения. Например, при диагностике бактериальных инфекций классический посев занимает от нескольких дней, а с ПЦР-анализом пациент сможет принять меры и начать лечение уже через сутки.
Для исследования подходит любой биоматериал: кровь, моча, сперма, мокрота, гной, жидкости из абсцессов и пр. Кроме этого, ПЦР применяется в самых разных областях науки и медицины, работая даже там, где другие методы бессильны. Диагностика латентных инфекций. ПЦР-диагностика определяет возбудителя инфекции даже в инкубационном периоде и при скрытом течении заболевания. Какие есть недостатки Единственный серьезный недостаток, связанный с методом полимеразной цепной реакции, - его высокая технологичность. Исследования ПЦР требуют строжайших соблюдений правил и серьезной оснащенности лабораторного комплекса.
На сегодня для них проведено уже более 15 тысяч тестов. С 15 мая на ИФА-тестирование в городские поликлиники приглашаются москвичи в рамках исследования формирования иммунитета к коронавирусу. Массовое ИФА-тестирование позволит выявить три категории людей: Бессимптомных носителей, у которых болезнь никак не проявляется, но они могут заражать других, не подозревая об этом.
Пациентов с легкой и средней степенью течения болезни, у которых с момента заражения прошло две недели. За это время коронавирус мог опуститься в легкие, и обычный ПЦР-тест может его не обнаружить. Пока принять участие в скрининге можно только по приглашению. Участники определяются методом случайной выборки среди всех возрастных групп и городских административных округов. Жителям, выбранным для исследования, приходит смс или e-mail. Тем, у кого подтвержден коронавирус, как и тем, кто болен ОРВИ, такие приглашения не приходят. В сообщении указана ссылка для онлайн записи в пункт забора крови - запись доступна в течение 3 дней. Возможность сдачи теста всеми желающими в данный момент прорабатывается.
Кроме амплификации, то есть простого увеличения числа копий молекулы ДНК, с помощью ПЦР можно производить и другие манипуляции с генетическим материалом, например, сращивать фрагменты ДНК, вводить мутации и т. Это позволяет использовать ПЦР не только для диагностики инфекционных и генетических заболеваний, но и для установления отцовства, клонирования и выделения новых генов. ПЦР-диагностика проводится в специальных лабораториях с помощью амплификационного оборудования. В некоторых из них амплификация осуществляется при постоянной температуре, и для их проведения специальное оборудование не требуется. Еще одна популярная модификация ПЦР — мультиплексная амплификация МПА , которая позволяет проводить исследование сразу нескольких изучаемых фрагментов в одной пробирке. Это не только ускоряет и удешевляет проведение анализа, но и позволяет рассматривать одни фрагменты, получившиеся в результате реакции, в качестве положительных маркеров для других, что еще больше увеличивает точность исследования методом ПЦР. Сферы применения метода в клинической медицине В клинической медицине ПЦР-диагностика является одним из наиболее востребованных методов анализа в самых разных сферах: Урогинекология. Для инфекционных заболеваний такого рода характерны слабая выраженность симптомов и хроническое течение, нередко вызывающие бесплодие и невынашивание беременности у женщин. С помощью ПЦР можно выявить наличие целого «букета» половых инфекций: хламидиоза, нескольких видов микоплазмы, уреаплазмы, трихомониаза, гарднереллы, кандиды, гонококка, трепонемы. Кроме этого, ПЦР-диагностике поддается и группа вирусов, поражающих урогенитальный тракт у обоих полов, в особенности, вирус герпеса и вирус папилломы человека. Их своевременное выявление и лечение помогает избежать риска злокачественных заболеваний шейки матки у женщин. Существует множество микроорганизмов, способных поражать плод еще в утробе матери. ПЦР-диагностика позволяет эффективно выявлять наличие неонатальных инфекций как на внутриутробном этапе, так и у новорожденных. К опасным инфекциям относятся цитомегаловирус, токсоплазмы, вирусы краснухи и герпеса, хламидии, микоплазмы. Служба крови. Чтобы избежать риска переливания, пациентам инфицированной опасными заболеваниями крови или плазмы ВИЧ, сифилис, гепатиты также используется метод ПЦР. Он значительно превосходит по точности серологические методы, поскольку способен выделить даже те инфекции, которые имеют длительный инкубационный период и не определяются при помощи обычных исследований в течение первых нескольких недель. Клиника инфекционных заболеваний. К ним относятся вирус гепатита, СПИД, сальмонеллез, хеликобактериоз, холера, бруцеллез, туляремия, дифтерия, токсоплазмоз и другие инфекции. Фтизиатрия и пульмонология. ПЦР-диагностика позволяет выявить возбудителей атипичных пневмоний и рецидивирующих хронических бронхитов, которыми являются хламидии и микоплазмы. Кроме того, с ее помощью можно не только поставить диагноз, но и провести видовую идентификацию возбудителя, то есть выявить конкретный штамм. Метод ПЦР используется также для ранней и высокоточной диагностики туберкулеза. На заметку ПЦР-диагностика используется в криминалистике для определения принадлежности найденного на месте преступления биоматериала, а также в экспериментальной медицине, создании генетических паспортов, мониторинге состояния окружающей среды, анализе продуктов питания, фармакологии, ветеринарии. Преимущества ПЦР-диагностики Хотя ПЦР-диагностика и является относительно «молодым» методом, широкое распространение в медицинской практике она получила благодаря явным преимуществам перед другими способами анализа: Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ ИФА , выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции.
Таким образом можно сдержать распространение пандемии. В лицензированных частных клиниках вы можете пройти 2 вида тестирования — так называемый ПЦР-тест и тест на антитела. Но какой из них лучше выбрать и какой точнее? Рассмотрим особенности каждого из них, чтобы найти ответ. Анализ проводят по биоматериалу, взятому из носа или зева пациента. Сюда клетки вируса попадают первым делом, поэтому тест будет эффективен с первых дней. Мазок берут в клинике, но само лабораторное исследование проводится в Государственном научном центре дерматовенерологии. Для проверки на вирус используется тест-система от этого же Государственного научного центра дерматовенерологии. Результаты анализа можно получить через 3 дня. Возможно бесконтактное проведение процедуры вам передают набор для взятия мазка и вы потом передаете его так же бесконтактно медикам. ПЦР-тест позволяет установить, что инфекция находится в организме в данный момент. В заключении будет лишь указано, выявлен возбудитель или нет.
В Роспотребнадзоре объяснили, чем отличается экспресс-тест на COVID-19 от ПЦР
По хорошему, если у пациента с симптомами тест ПЦР показал отрицательный результат, то человеку должны сделать и КТ, и тест на антитела», — заключил он. Подробное описание: что такое ПЦР-тест на ковид, что показывает и как узнать результат. Как проводится забор биоматериала, как подготовиться. Подробное описание процедуры и результатов в нашей экспертной статье. ПЦР тест на коронавирус – это анализ полимеразной цепной реакции (PCR), который проводится с помощью взятия мазка со слизистой рта и носоглотки и позволяет диагностировать даже бессимптомное течение болезни. Касательно самих ПЦР-тестов, которых к настоящему моменту зарегистрировано несколько десятков, принципиальных различий между ними, по мнению иммунолога, нет. Чаще всего ПЦР-тест показывает ложноположительный результат из-за наличия в носу или ротоглотке фрагментов уже погибшего вируса, рассказал в интервью Лайфу доктор медицинских наук, практикующий врач, профессор Антон Ершов.
Что такое ПЦР анализ
Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты. Эта стадия длится 10 - 15 мин. Подготовка материала к исследованию и транспорт его в лабораторию Для успешного проведения анализа важно правильно собрать материал у пациента и правильно провести его подготовку.
Для взятия крови в лаборатории ИНВИТРО в настоящее время применяются вакуумные системы, которые с одной стороны минимально травмируют пациента, а с другой - позволяют произвести взятие материала таким образом, что он не контактирует ни с персоналом, ни с окружающей средой. Это позволяет избежать контаминации загрязнения материала и обеспечивает объективность анализа ПЦР. Словарь ДНК — дезоксирибонуклеиновая кислота - биологический полимер, один из двух типов нуклеиновых кислот, обеспечивающих хранение, передачу из поколения в поколение и реализацию генетической программы развития и функционирования живых организмов. В природе РНК, как правило, существует в виде одиночной цепочки.
У некоторых вирусов РНК является носителем генетической информации. В клетке играет важную роль при передаче информации от ДНК к белку. Процесс этот называется транскрипцией. Все три вида РНК тем или иным способом участвуют в синтезе белка.
Однако информация по синтезу белка содержится только в мРНК. Нуклеотиды, представленные в нуклеиновых кислотах, содержат одну фосфатную группу. Они называются по содержащемуся в них азотистому основанию - адениновый A , содержащий аденин, гуаниновый G - гуанин, цитозиновый C - цитозин, тиминовый Т - тимин, урациловый U - урацил. При образовании нуклеиновых кислот нуклеотиды, связываясь, образуют сахаро-фосфатный остов молекулы, по одну сторону которого находятся основания.
Какую информацию дает тест на антитела Тест на антитела проводят иммуноферментным методом по анализу крови из вены тоже в лаборатории Государственного научного центра дерматовенерологии. При этом определяют не наличие самого вируса, а наличие антител к нему. Во время теста подсчитывается их количество для установления стадии заболевания. Возможно проведение теста на один из видов антител или оба второй вариант более информативный, поэтому он предпочтительнее. Первый тип антител, IgM, выделяется в организме с первых дней развития болезни, что происходит на 2-7 день после заражения. Они остаются в крови около 1-2 недель, а после выздоровления исчезают. Что означает положительный результат на антитела IgM? Вариантов может быть несколько, в зависимости от подсчитанного количества: если иммуноглобулинов данного типа немного, то COVID-19 находится на начальном этапе развития; если количество зашкаливает, значит сейчас острая фаза. В это время человек все еще является разносчиком инфекции, даже если у него нет никаких симптомов; присутствие IgM в небольшом количестве в сочетании с IgG указывает на завершение болезни.
Иммуноглобулин типа G производится в острой стадии и остается в крови после выздоровления, обеспечивая иммунитет длительное время. Если тест показал наличие антител к коронавирусу типа IgG, значит у вас уже есть иммунитет к данному заболеванию и вы не представляете опасности для окружающих. Небольшое количество иммуноглобулинов свидетельствует о том, что вы переболели недавно.
Если тестирование показало, что антитела к коронавирусу присутствуют, это еще не значит, что их носитель больше никогда не заболеет. Хотя статистика имеется небольшая, вирусологи пришли к выводу, что положительный тест на антитела может ненадолго приравниваться к вакцинации. Однако это справедливо в течение полугода после выявления инфекции. По истечении этого срока вновь появляются риски, и пациенту рекомендована прививка. Как расшифровать анализ на антитела? Обследуемый на антитела может иметь в организме несколько видов белков, вырабатываемых иммунной системой: IgM — реакция на любую острую инфекцию. Обычно присутствуют в организме в течение месяца после заражения, однако при COVID-19 этот срок увеличивается до 3 месяцев. Могут сохраняться даже в отсутствие вируса. Их количество должно снижаться по мере выздоровления. IgG — запоминающая реакция организма на перенесенную инфекцию. Синтезируются через 6 недель после заражения и формируют иммунитет. Если в анализе на антитела есть IgA, значит, человек столкнулся с коронавирусом. Если их сопровождают IgG, то больной выздоравливает, если нет — инфекционное заболевание протекает в данный момент. Об устойчивости иммунной системы к вирусу говорит показатель IgG более 1,1. Возможен ли экспресс-анализ? Пройти диагностику на антитела можно и в домашних условиях. Брать ее можно как из пальца, так и из вены, хотя второй способ без медсестры реализовать сложно. Проходить экспресс-диагностику на антитела лучше натощак. В набор входит одноразовый ланцет для прокола кожи. Кровь помещается в лунку тестового устройства, где смешивается с буферной жидкостью. Индикаторная реакция происходит в течение 10-20 минут. В зависимости от окрашивания определенных зон, можно обнаружить наличие IgM, IgG или их отсутствие. Какой метод диагностики лучше? Формулировать вопрос таким образом не совсем корректно.
Эта стадия называется плавлением денатурацией [fr] , так как разрушаются водородные связи между двумя цепями ДНК. Обычно перед первым циклом проводят длительный прогрев реакционной смеси в течение 2—5 минут для полной денатурации матрицы и праймеров. Отжиг[ править править код ] Когда цепи разошлись, температуру понижают, чтобы праймеры могли связаться с одноцепочечной матрицей. Эта стадия называется отжигом. Температура отжига зависит от состава праймеров и обычно выбирается на 5 градусов меньше, чем температура плавления праймеров. Неправильный выбор температуры отжига приводит либо к плохому связыванию праймеров с матрицей при завышенной температуре , либо к связыванию в неверном месте и появлению неспецифических продуктов при заниженной температуре. Время стадии отжига — 30 секунд [ источник не указан 805 дней ], одновременно, за это время полимераза уже успевает синтезировать несколько сотен нуклеотидов. Элонгация[ править править код ] ДНК-полимераза реплицирует матричную цепь, используя праймер в качестве затравки. Это — стадия элонгации. Температура элонгации зависит от полимеразы. Время элонгации зависит как от типа ДНК-полимеразы, так и от длины амплифицируемого фрагмента. Обычно время элонгации принимают равным одной минуте на каждую тысячу пар оснований. После окончания всех циклов часто проводят дополнительную стадию финальной элонгации, чтобы достроить все одноцепочечные фрагменты.
3 вида тестов на коронавирус: преимущества и различия
В первую неделю агентство собирается выпустить 100 тыс. Высокая чувствительность тест-системы позволяет обнаружить даже низкие концентрации нуклеиновых кислот коронавируса 103 молекулы. На разных стадиях разработки и готовности к регистрации находятся тесты еще около 10 компаний — например, новосибирская компания «Вектор-бест», «Система-Биотех» «дочка» «АФК-Системы» , «Тестген» и компания «ДНК-технологии». По некоторым данным, в Москве проводится около 700 тестов на коронавирус в сутки. В планах у московских властей увеличить этот показатель до 10 тыс. Новые разработки за рубежом Компания Bosch выводит на рынок свой тест на коронавирус, который сначала будет доступен в Германии, а вскоре появится в других странах.
В его основе лежит диагностический аппарат Vivalytic, который, по словам изготовителей, станет первым автоматизированным тестом на COVID-19. Тест распознает не только коронавирус, но еще шесть респираторных заболеваний, например, вирусы гриппа А и B. Как пишет издание ZME Science, анализ может проводиться прямо в стационаре или медицинском центре — не нужно отправлять образцы в лабораторию и ждать, пока придет ответ. Врачи смогут быстрее идентифицировать и изолировать зараженных, а пациентам не придется пребывать в неизвестности несколько дней. Тест прост в обслуживании и не требует специальной подготовки.
Медперсоналу нужно только взять мазок из носа или горла пациента, нанести его на картридж, содержащий реагент, и вставить картридж в анализатор. Каждый аппарат может выполнять до десяти анализов за 24 часа. Одновременно проходить тест могут до шести человек. FDA в экстренном порядке одобрило сверхбыстрый тест на коронавирус, разработанный калифорнийской компанией Cepheid. С его помощью диагноз можно будет поставить всего за 45 минут.
Как отмечает Business Insider, для обработки результатов теста не требуется специальное обучение. Начало тотального тестирования людей на COVID-19 во всем мире — хорошая новость как для людей, так и для национальных органов здравоохранения. До сих пор в мире нет четкого представления о том, сколько людей заражены коронавирусом и выявление тех, у кого он уже есть: их госпитализация или отправка на домашний карантин позволит быстрее оценить масштаб угрозы и вовремя принять правильные меры.
Понятно, что теперь определить, какой возбудитель у данной конкретной инфекции, достаточно легко. Достоинства Теория — это, безусловно, замечательно, но что мы имеем на выходе? Какую практическую выгоду получает человек, когда отправляется на поиски вредоносных микроорганизмов, вооруженный ПЦР?
Безусловно, одно из главных достоинств — это универсальность метода. Оборудование, используемое для ПЦР, стандартно, оно не зависит от того, что именно и где именно мы ищем. Следующий плюс — высокая специфичность. В материале, направленном на исследование, определяется уникальная последовательность нуклеотидов, характерная только для конкретного возбудителя. Кроме того, это позволяет одновременно, в одном и том же материале, проводить поиск нескольких возбудителей без какого-либо ущерба для качества ответа. Метод обладает высочайшей чувствительностью — мы уже говорили о том, что возможно найти всего один фрагмент генетического материала возбудителя.
Несомненное преимущество метода — оперативность. Постановка реакции занимает несколько часов, таким образом, вся диагностика, от момента сдачи материала на анализ до получения результата, отнимет всего один день. При помощи ПЦР определяют возбудителя , а не реакцию на его внедрение со стороны организма. Таким образом, появилась возможность точно диагностировать заболевание еще в инкубационном периоде, когда нет никаких клинических или лабораторных признаков болезни. Но они напрямую связаны с его достоинствами и с так называемым «человеческим фактором». ПЦР — очень высокотехнологичный метод, требующий соблюдения строжайших правил оснащения лаборатории.
Это связано с тем, что в воздухе постоянно присутствует невероятный коктейль из фрагментов ДНК всевозможных живых организмов, и в процессе подготовки к проведению реакции образец может быть загрязнен — возможно «ложное срабатывание».
Используется в некоторых методиках секвенирования и гибридизационного анализа. ПЦР проводится как обычно, за исключением того, что один из праймеров берётся в большом избытке. ПЦР проводят при высокой температуре отжига, тем самым удаётся поддержать эффективности реакции на протяжении всех циклов [18]. В этом методе используют флуоресцентно меченые ДНК-зонды для анализа накопления продукта реакции или интеркалирующий краситель SYBR Green или его аналоги. Sybr Green I [en] обеспечивает простой и экономичный вариант для детекции и количественного определения ПЦР-продуктов в ходе ПЦР в режиме реального времени без необходимости использования специфичных флуоресцентных зондов или праймеров. Кроме главного, в спектре красителя имеются два небольших дополнительных максимума поглощения — при 290 нм и 380 нм. Первые циклы проводят при температуре выше оптимальной температуры отжига, затем каждые несколько циклов температуру отжига постепенно снижают до оптимальной. Это делается для того, чтобы праймер гибридизовался с комплементарной цепью всей своей длиной; тогда как при оптимальной температуре отжига, праймер частично гибридизуется с комплементарной цепью.
Частичная гибридизация праймера на геномной ДНК приводит к неспецифической амплификации, если участков связывания для праймера достаточно много. В точках, содержащих анализируемую ДНК, происходит амплификация с образованием молекулярных колоний. Вторая полимераза необходима для коррекции ошибок, внесённых первой, так как Taq-полимераза останавливает синтез ДНК, если был добавлен некомплементарный нуклеотид. Этот некомплементарный нуклеотид удаляет Pfu-полимераза. Смесь полимераз берётся в отношении 50:1 или даже меньше 100:1, где Taq-полимеразы берётся в 25—100 раз больше, чем Pfu-полимеразы.
Они утверждают, что антитела у людей, переболевших СOVID-19, сохраняются как минимум на полгода и уменьшают риск заболеть повторно.
Еще через полгода медики планируют проверить участников исследования заново, чтобы узнать, сохранятся ли антитела в течение года. ВАЖНО: даже в случае положительного результата на IgG обязательно соблюдение мер социального дистанцирования и использование средств индивидуальной защиты. Насколько точны тесты на коронавирус? Вот мнение доктора Комаровского Доктор Евгений Комаровский считает, что и ПЦР-тесты, и тесты на антитела нельзя рассматривать как догму. Известный украинский педиатр пишет , что наличие или отсутствие антител еще ни о чем не говорит: можно переболеть коронавирусом и получить отрицательные анализы. Он говорит, что лечение должно в первую очередь зависеть от симптомов, а не от результатов теста.
Многие медицинские лаборатории уточняют, что тест для определения антител классов М и G — это вспомогательный метод диагностики COVID-19. Его результат должен интерпретировать врач. Доктор Комаровский обращает внимание на то, что в США регулярно публикуют данные об ошибочных результатах тестов. Почему не выявляют такие лаборатории и не обнародуют данные? Если результат не всегда верный, зачем вообще сдавать тест на антитела? При невозможности исследования мазков методом амплификации нуклеиновых кислот ПЦР-анализ.
Для выявления людей с бессимптомной формой инфекции. Для установления факта перенесенной ранее инфекции.
Что такое ПЦР тест на коронавирус и как правильно сдавать мазок
| Почему ПЦР-тесты не выявляют COVID-19: на какой день заболевания коронавирусом надо делать тест | Метод ПЦР: анализ на гепатит С. Количественная и качественная ПЦР-диагностика: когда она нужна, что покажут анализы, как подготовиться? |
| 7 вопросов про ПЦР-тест | Есть просто ПЦР-тест на вирусную РНК, есть тест на антитела к вирусу. Надо знать марку, вид теста, компанию-производителя теста и на какой день заболевания проводилось тестирование. |
| Что такое ПЦР | Обзор 28 исследований показывает, что ПЦР-тест остаётся положительным в среднем 18 дней. Однако у примерно 20% людей ПЦР-тест остается положительным еще в течение нескольких месяцев. |
| Что такое анализ ПЦР? - статья лаборатории ДНКОМ | Как объявление вирусных пандемий на основе тестов ПЦР может закончиться катастрофой, описала Джина Колата в своей статье в New York Times 2007 года «Вера в быстрое тестирование ведет к эпидемии, которой не было». |
| Чем отличается ПЦР от антител на КОВИД тест | Например, тест на полимеразную цепную реакцию (ПЦР) более чувствителен, чем экспресс-тесты на антигены, которые вы можете провести дома. |
В Роспотребнадзоре объяснили, когда ПЦР будет положительным при заражении «омикроном»
Через три недели после начала заражения две трети проверок дали отрицательный результат. Таким образом, это может быть оптимальным временем для тестирования, если цель — минимизировать ложноотрицательные результаты», — сообщили авторы исследования. Конечно, далеко не все больные точно знают, когда подхватили вирус, зато назвать момент первых признаков недомогания может почти каждый. Впрочем, сами авторы подчеркивают, что вероятность получить ложный ответ есть в любой день. Например, у некоторых людей за счет индивидуальных особенностей почему-то снижена вероятность выделения SARS-Cov-2.
Проблема и в том, что коронавирус так ловко научился прятаться в клетках человеческого организма, что ПЦР-тесты в большинстве случаев не могут его обнаружить. Об этом специалисты говорили на конференции, посвященной тенденциям развития опаснейшей инфекции. С тех пор мы сильно продвинулись в лечении этой инфекции. Хотя, конечно, с таким заболеванием, отличающимся от остальных, мы до прошлого года не встречались, - утверждает директор Института биомедицинских исследований и терапии Александр Караулов.
Как же отличить коронавирус от гриппа?
Если у вас все симптомы коронавируса, а результаты теста оказались отрицательными, то это ничего не означает. Значит, плохо выделили РНК. Нужно сдавать еще раз", - говорит он.
И добавляет: "Я бы посоветовал людям, которые чувствуют у себя легкую форму коронавируса, не сдавать тест. Ведь человек без хронических заболеваний перенесет все легко. Даже если вы с помощью ПЦР узнаете, что это коронавирус, что это изменит? В больницу все равно вас не примут, а если и примут, то положат в лучшем случае в коридоре.
И за вами будут ухаживать загнанные медсестры, которые на вас даже внимание обращать не будут". Поэтому, говорит он, сдавать тест стоит только при симптомах. Не бойтесь ехать в лабораторию сдавать тест. Для вас уже никто не представляет опасности, так как вы уже заболели коронавирусом", - добавляет специалист.
Что такое экспресс-тест? Осталось лишь разграничить понятия "ПЦР" и "экспресс-тест". Если первый показывает, есть в организме вирус или нет прямо сейчас, то второй указывает на наличие антител. Если они есть, значит, организм уже справился с болезнью.
Хороших экспресс-тестов очень мало. И естественно, бизнес покупает самый дешевый вариант.
Как правило, это свидетельствует о перенесённой инфекции. Какие ещё варианты? Исследование занимает всего 15 минут, однако его точность недостаточно высока. Он выявляет только иммунный ответ, но не обнаруживает РНК вируса. И делает это не слишком точно, чтобы полученные результаты использовать в практических целях. Так что выбрать? Но для повышения точности нужна подготовка: в течение 4 часов — не пить и не кушать, не курить и не чистить зубы.
Нарушение этих ограничений, а также использование спрея для полости рта или носа не позволит получить надлежащий результат. Тест на антитела — всего лишь ответ иммунной системы на угрозу. Он позволяет выяснить, болеет человек прямо сейчас или перенёс инфекцию в недавнем прошлом. Антитела, конечно, снижают риск заражения, но не сводят его к минимуму.
Тестирование на коронавирус: как и когда сдавать?
Полимеразная цепная реакция — основной метод, который Минздрав рекомендует для выявления ковида. Принцип забора одинаков с обычными ПЦР-тестами. 7 декабря принято решение сократить срок действия отрицательного ПЦР-теста с 72 до 48 часов.