ПЦР-анализ, в отличие от теста на выявление антител, должен определить, присутствует ли вирус в организме прямо сейчас, или пациент перенес инфекцию в прошлом. HCV, РНК [реал-тайм ПЦР]: описание, синонимы, методы исследования, какой биоматериал можно использовать, как правильно подготовиться, для чего используется, когда назначается, что означают результаты.
ПЦР: сверхчувствительная диагностика инфекций
Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя слюна, кровь, моча, выделения из половых органов , помещается в специальный реактор амплификатор. Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей. Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека. Метод ПЦР в настоящее время расширяет круг возможностей проводимых исследований: введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК, и получил широкое распространение в медицине, к примеру, для установления отцовства, появление новых генов и прочее. Материал для исследования и правила его забора Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: слизи, моче, крови, мокроте, соскобе эпителиальных клеток, тканях плаценты, крови, соке простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость. При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем ИППП , у мужчин и женщин забираются выделения из половых органов, мазок или соскоб из шейки матки, мазок или соскоб из уретры мочеиспускательного канала , моча. Нередко для обследования на поражение нервной системы при ряде исследований забирается спинномозговая жидкость. В пульмонологии материалом служит мокрота, плевральная жидкость.
При обследовании на внутриутробные инфекции — околоплодные воды, ткани плаценты. Подготовка к сдаче материала и проведению ПЦР-диагностики Практически все пациенты, которым проводится ПЦР-диагностика, вправе рассчитывать на достоверный, точный и быстрый результат, зависящий в большой степени от возможности лаборатории, профессионализма врача-лаборанта. Вместе с тем, многие не задумываются, что эта самая достоверность во многом зависит и от нас самих, а именно от рекомендаций лечащего доктора, образа жизни и правильности забора материала.
Какой врач проводит расшифровку ПЦР-исследований Первично назначается анализ либо венерологом, либо урологом, либо гинекологом для женщин. Оценка анализа и выставление результатов в бланке ответа — это функция врача-лаборанта, проводившего исследование. Дальнейшая интерпретация полученных данных — это функционал узкого специалиста, к которому обращается пациент. Врач назначает такие исследования обычно при: признаках острого воспаления урогенитального тракта, для уточнения причины воспаления, перед планируемой беременностью или эко, у беременных с отягощенной акушерской историей, для контроля эффекта от проводимого лечения по поводу вензаболевания не раньше, чем спустя месяц после окончания терапии , в качестве скрининга для исключения бессимптомного течения инфекции при наличии более одного партнера за год. Методы молекулярной биологии имеют важное от культуральных или серологических методик отличие. Они не требуют определенного накопления возбудителя или антител к нему и чувствительны практически сразу от момента заражения.
Нет смысла выдерживать паузу в течение предполагаемого инкубационного периода венерической инфекции. Анализ можно сдавать сразу после того, как возникли подозрения о возможном заражении или развитии инфекционного агента. ПЦР: результат отрицательный Отсутствие возможности даже ускоренного ферментами удвоения фрагментов генетического материала говорит об отрицательном результате исследования. Чаще всего при отрицательном результате речь идет о том, что специфические для искомого возбудителя ДНК или РНК не обнаружены.
Результат «обнаружено» в этом анализе расшифровывается как инфицирование одним из вирусов данной группы или несколькими из них, но какими именно, исследование не покажет. Таким образом, скрининг только фиксирует заражение или его отсутствие на данный момент. Он не может показать количество вируса в организме и не может быть основанием для назначения лечения.
Присутствие ДНК ВПЧ не означает, что человек болен — это лишь повод для более тщательного наблюдения в дальнейшем и повторной сдачи анализов через год — два. Возможно, через этот срок вирус покинет организм. Кроме единой строчки с перечислением номеров ВПЧ, в таблице на бланке такого анализа будет лишь еще одна строка — КВМ. Эта аббревиатура расшифровывается как «контроль взятия материала». Данный показатель нужен для того, чтобы видеть, правильно ли проведена процедура забора биоматериала, достаточно ли в нем клеток эпителия, чтобы выполнить корректную амплификацию. Если этот показатель меньше, значит, материал был взят неправильно. В полученном образце слишком мало клеток, и среди них может не оказаться пораженных вирусом.
Тогда будет получен ложноотрицательный результат. Дифференцированный анализ ПЦР В данном анализе используется генотипирование — определение специфической последовательности ДНК каждого из исследуемых штаммов в отдельности. Так можно определить, какой конкретно штамм присутствует в организме. Также выполняется оценка КВМ. Читайте также: Это тоже скрининговый метод, только расширенный, более подробный. Он фиксирует лишь факт заражения, но не определяет, стал ли конкретный вид ВПЧ провокатором заболевания. Однако вместе с цитологическим мазком, такой ПЦР-анализ повышает эффективность выявления ассоциированных с ВПЧ заболеваний половых органов.
Количественный анализ ПЦР Количественный анализ диагностически более значим, чем качественный, ведь он определяет вирусную нагрузку на организм. Обычно назначается при положительных результатах качественного теста. Концентрация вируса в тканях отражает тяжесть течения инфекции, позволяет врачу составить прогноз ее течения с учетом клинических симптомов или отследить результативность проведенного лечения. В количественном анализе подсчитывается число копий вируса, приходящихся на число клеток эпителия. Это значит, что вирус для организма неопасен и, скорее всего, иммунная система успешно подавит его. Такой результат у женщины дает основания для беспокойства. Скорее всего, врач назначит кольпоскопию с биопсией, чтобы выяснить, в каком состоянии находится эпителий шейки матки.
При лечении заболеваний, ассоциированных с ВПЧ, имеет значение отслеживание вирусной нагрузки в динамике. Если же вирусная нагрузка в контрольных анализах через 3, 6 9, 12 месяцев после лечения на порядок увеличилась — это признак рецидива инфекции. Крем и таблетки: цена, отзывы, аналоги Результаты количественного или качественного анализа обычно готовы уже на следующий день после сдачи. Он позволяет выявить конкретные штаммы, присутствующие в клинически значимой концентрации. Этот анализ и самый дорогой. Его цена примерно в два раза выше, чем у качественного анализа на такое же количество штаммов в среднем 2200 против 1200 не считая стоимости забора материала. Дайджин-тест более простой в выполнении, чем ПЦР-анализ, и вместе с этим отличается высочайшей надежностью.
Поэтому многие развитые страны включают в скрининговое исследование именно его. Тест может быть комплексным — для группы низкого и повышенного риска, или проводиться отдельно для каждой группы. Оценивается только присутствие вирусов в клинически значимой концентрации, то есть одновременно оценивается и вирусная нагрузка. В группе высокоонкогенных вирусов проверяется наличие 13 типов: 16, 18, 31, 33, 39, 35, 45, 51, 52, 56, 59, 58, 68 штаммов.
Метод ПЦР применяется во многих сферах деятельности, в том числе в качестве быстрого и высокоточного способа диагностики определенных инфекционных и генетических заболеваний человека, а также для выявления спонтанных или унаследованных изменений в ДНК, исследованиях генома сельскохозяйственных растений и животных для селекционных и других задач, в криминалистике, археологии, установлении отцовства, клонировании и секвенировании геномов и прочих сферах деятельности человека. Вирусы, бактерии и грибы - основные человеческие патогены - содержат ДНК или РНК, причем для каждого вида последовательность нуклеотидов уникальна. Короткие фрагменты, комплементарные целевым участкам нуклеотидов каждого возбудителя, называются праймерами. В основе анализа на ПЦР лежит создание большего числа копий генетического материала ДНК или РНК с помощью этих самых праймеров и специальных ферментов посредством серии циклов нагрева и охлаждения. Полученные амплифицированные сегменты далее методом гель-электрофореза или с помощью другой технологии сравниваются с другими нуклеотидными сегментами из известного источника например, патогенного микроорганизма для определения их идентичности.
Это один из основных методов обнаружения бактерий или вирусов на молекулярном уровне, с более высокой степенью точности, чем микроскопические или бактериологические исследования, и значительно более быстрый, чем метод культивирования. Это также единственный способ определить наличие генетических вариаций, указывающих на предрасположенность к онкологическим и другим заболеваниям. Чувствительность диагностических инструментов для выявления мутаций онкогенов и генов подавления опухоли была улучшена по крайней мере в десять тысяч раз благодаря ПЦР, что позволяет раньше диагностировать, например, такие виды рака, как лейкемия. Метод ПЦР также позволил разработать индивидуальную терапию для больных раком. Кроме того, ПЦР может использоваться для типирования тканей, которое имеет жизненно важное значение для имплантации органов. Образцы берут либо с помощью амниоцентеза либо с помощью биопсии ворсин хориона. В отличие от многих других тестов, ПЦР тест способен обнаружить признаки заболевания на самых ранних стадиях инфицирования, так как для выделения искомого ДНК или РНК достаточно минимального количества генетического материала патогена в образце биоматериала.
Что значит ПЦР РНК анализ гепатита С?
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того. Минимальная вероятность получить ложноотрицательный результат теста на COVID-19 наступает на восьмой день после заражения, или на третий после появления первых симптомов. Молекулярное тестирование, включая тестирование с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР), выявляет генетический материал вируса и, таким образом, может определить, инфицирован ли человек SARS-CoV-2 в настоящее время. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — метод молекулярной биологии. Основы полимеразной цепной реакции (ПЦР).
ПЦР анализ: что это такое? На какие 12 инфекций сдается?
| ПЦР анализ 12: что это такое? Подготовка и сдача анализа, расшифровка результатов | Если вируса нет, а в ПАП-тесте указано «NILM», тестирования раз в 3 года будет совершенно достаточно. |
| Почему "ошибаются" ПЦР-тесты - эксперт | Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии, так и задолго до того. |
| ПЦР анализ – что это такое, как делают ПЦР анализ крови. | Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это лабораторно–диагностическое исследование, позволяющее определить возбудителя той или иной инфекции. |
| HCV, РНК [реал-тайм ПЦР] | Дайджин-тест более простой в выполнении, чем ПЦР-анализ, и вместе с этим отличается высочайшей надежностью. |
Анализы на коронавирус. Какие сдавать и что означают результаты?
Тем более, что такая дружба дала им одно очень важное преимущество. Репликация ДНК. Рано или поздно клетке надо будет поделиться, обеспечив рост организма или размножение. При этом всю эту хитро упакованную многометровую махину ДНК надо аккуратно скопипастить так, чтобы две дочерние клетки получили максимально точную копию оригинала. Вот тут-то и пригодилась двойная спираль - специальные белки в нужный момент расцепляют цепи, и на основании каждой цепи достраивается ее комплементарная копия. Отвечает за это фермент под названием полимераза. Она ползет по старой одиночной цепи ДНК и вставляет в новую цепь буквы, комплементарные старой. Видит А - вставляет Т, видит G - C, ну вы поняли. Чтобы полимераза могла сесть на одиночную цепь ДНК и начать свое дело, ей нужна затравка - это уже готовый маленький кусочек второй цепи, сидящий на первой. Его еще называют праймер.
В клетках его делает специальный фермент праймаза, да и вообще там на самом деле жесть все как сложно, но об этом в другой раз. Адская схема репликации. Все, что надо понять - была одна двойная спираль, а стали две, и помогли им в этом, помимо все прочего, праймеры и полимераза. Так или иначе, в итоге вся ДНК в клетке удваивается, и вот теперь клетка может спокойно делиться. Прочитали до сюда? Вот теперь можем переходить непосредственно к ПЦР. Ученые уже десятилетия изучают свойства ДНК. Выделяют из живых организмов, синтезируют искусственно... Потому что когда его мало, то труднее ставить эксперименты - проще запороть, загрязнить чем-то чужеродным и т.
И тогда в далеком 1983м один любящий галлюциногены ученый Кэри Муллис решил использовать для этого то, что давно уже придумала природа - репликацию, только искусственную, в пробирке.
Использование передовых технологий позволяет: определить причины острых уретритов — берут соскоб клеток из мочеиспускательного каналы у мужчины или женщины, влагалища, цервикального канала; диагностировать циститы, особенно хронические — через мочу или соскоб из шейки мочевого пузыря; тщательно обследовать простатит — берется секрет простаты; определить воспалительные заболевания головки полового члена и крайней плоти — соскоб клеток высыпаний; диагностировать ряд кожных патологий. В гинекологии ПЦР-анализы — обязательная диагностическая процедура, входящая в профиль обследований различных женских патологий. В первую очередь это диагностика широкого спектра заболеваний, передающихся половым путем. Врач может назначить анализ при подозрении на хламидиоз, гонорею, герпес, вирусы папилломы человека. В качестве биоматериала обычно выступают кровь, моча или вагинальный соскоб. Метод ПЦР — наиболее точный способ выявления Covid-19. Его преимущество в том, что он обнаруживает сам вирус. Подтвердить патогенного агента удастся даже при бессимптомном течении заболевания. И, наоборот, диагностика не даст положительного результата, если много антител, а самого вируса уже нет.
Для проведения теста у вас возьмут образец слизи из носа или горла. Тампон на несколько секунд оставляют на слизистой, потом поворачивают и с небольшим нажимом извлекают, далее герметично упаковывают в пробирку и отправляют на анализ. Приборная база для применения метода полимеразной цепной реакции в лаборатории обычно включает: амплификатор термоциклер ; систему для гель-электрофореза с источником питания — для визуализации результатов ПЦР; систему гель-документации — для анализа результатов; ПЦР-бокс — для пробоподготовки;.
Например, материал для исследования, в котором предполагается наличие фрагментов ДНК или РНК возбудителя слюна, кровь, моча, выделения из половых органов , помещается в специальный реактор амплификатор. Далее к нему добавляются специфические ферменты, которые связываются с ДНК или РНК патогена, и происходит синтез ее копии. Это копирование идет в несколько этапов по типу «цепной реакции», и в конечном итоге из одной копии генетического материала могут образоваться сотни и тысячи копий. Затем идет анализ и сравнение результата с имеющейся базой данных о строении различных возбудителей.
Посредством ПЦР можно не только выявить тип возбудителя, но и выдать количественный результат анализа, то есть как много возбудителей в организме человека. Метод ПЦР в настоящее время расширяет круг возможностей проводимых исследований: введение мутаций, сращивание фрагментов ДНК, и получил широкое распространение в медицине, к примеру, для установления отцовства, появление новых генов и прочее. Материал для исследования и правила его забора Материалом для ПЦР-исследования, в котором можно выявить чужеродную ДНК бактерии или ДНК или РНК вируса могут служить различные биологические среды и жидкости человека: слизи, моче, крови, мокроте, соскобе эпителиальных клеток, тканях плаценты, крови, соке простаты, околоплодные воды, плевральная жидкость. При обследовании на инфекции, передающиеся половым путем ИППП , у мужчин и женщин забираются выделения из половых органов, мазок или соскоб из шейки матки, мазок или соскоб из уретры мочеиспускательного канала , моча. Нередко для обследования на поражение нервной системы при ряде исследований забирается спинномозговая жидкость. В пульмонологии материалом служит мокрота, плевральная жидкость. При обследовании на внутриутробные инфекции — околоплодные воды, ткани плаценты.
Подготовка к сдаче материала и проведению ПЦР-диагностики Практически все пациенты, которым проводится ПЦР-диагностика, вправе рассчитывать на достоверный, точный и быстрый результат, зависящий в большой степени от возможности лаборатории, профессионализма врача-лаборанта. Вместе с тем, многие не задумываются, что эта самая достоверность во многом зависит и от нас самих, а именно от рекомендаций лечащего доктора, образа жизни и правильности забора материала.
При антивирусной терапии повышение количества антител свидетельствует о развившейся устойчивости к лекарствам, это является сигналом для корректировки лечения. Если они отсутствуют, то пациент не заражен, при попадании возбудителя в кровь результат будет положительным.
Однако, с помощью качественной реакции невозможно уточнить геном вируса, этап заболевания. Поэтому для диагностики ВГВ проводят как количественное, так и качественное измерение. Подготовка к обследованию Для проведения анализа методом полимеразной реакции необходима венозная кровь. Это необходимо сделать утром на голодный желудок.
Пациенту следует правильно подготовиться к исследованию: За 10 часов отказаться от пищи, можно пить только чистую воду. Накануне прекратить прием алкоголя, за 4 часа не курить. Перед обследованием стоит избегать физических и эмоциональных стрессов. За 2 суток перестать употреблять лекарства, если это невозможно, то необходимо предупредить лаборанта.
Некоторые препараты оказывают влияние на конечный результат. Интерпретация данных При количественной реакции оценивают полученные показатели в зависимости от числа копий ДНК Интерпретировать данные качественного измерения несложно. Он дает либо положительный, либо отрицательный ответ. При количественной реакции оценить полученные показатели можно в зависимости от числа копий ДНК.
У пациента развился поствакцинальный иммунитет, либо он излечился от болезни. При числе копий 2х100 говорят о носительстве вируса. Количество 2х106 свидетельствует о хронической стадии болезни. При ДНК более 2х109 пациент болен острой стадией гепатита.
Ошибочные результаты Преимущества метода диагностики с помощью полимеразных реакцийи заключаются в следующем: Прямое обнаружение возбудителей. В отличие от него, метод ИФА дает информацию о присутствии антител к вирусу.
ПЦР-тестирование: как работает метод ПЦР в диагностике
ПЦР анализ на инфекции Полимеразная цепная реакция (ПЦР) – высокоточный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет выявить у человека различные инфекционные и наследственные заболевания, как в острой и хронической стадии. Роспотребнадзор напоминает о ключевых особенностях тестирования методом ПЦР и отвечает на самые часто задаваемые вопросы. Отличие иммуноферментного анализа (ИФА) от полимеразной цепной реакции (ПЦР) в том, что ПЦР относится к прямым методам выявления возбудителя инфекции, то есть позволяет определить РНК вируса SARS-CoV-2 в биоматериале человека. ПЦР или полимеразная цепная реакция — на сегодняшний день самый точный метод молекулярно-генетической диагностики, который позволяет узнать, присутствует ли в вашем организме вирус COVID-19. Что представляет собой анализ методом ПЦР? Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели.
ПЦР анализ: что это такое? На какие 12 инфекций сдается?
Минимальная вероятность получить ложноотрицательный результат теста на COVID-19 наступает на восьмой день после заражения, или на третий после появления первых симптомов. В зависимости от причины проведения ПЦР-теста положительный результат может указывать на наличие исследуемого возбудителя. Как расшифровать ПЦР Как работает ПЦР тест Ответы на эти и другие вопросы читайте в статье на нашем сайте. метод применяется в медицине, биологии, ветеринарии, криминалистике, санитарной службе и других отраслях деятельности человека. Роспотребнадзор напоминает о ключевых особенностях тестирования методом ПЦР и отвечает на самые часто задаваемые вопросы. ПЦР-тест (Мазок) на Коронавирус. Предназначение у него одно: определить есть ли вирус COVID-19 в организме в данный момент (Real-Time PCR).
Анализ ПЦР на гепатит С
Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели. IgA — показатели ранней инфекции, являются более точными в отличие от IgM, поскольку более специфичны. Как правильно прочитать результат Положительный результат — более 1,1. Говорит об обнаружении IgA и может означать: Текущую инфекцию сейчас в частности, бессимптомное течение Если одновременно определяются IgG, то это период выздоровления или недавно перенесенная инфекция Пограничный результат — в интервале 0,8 — 1,1. Требует повторного исследования через 2 недели, поскольку может означать: - Начальный период инфекции, когда не успели сформироваться антитела в достаточном количестве. Как правило, в таком случае есть признаки болезни и требуется подтверждение методом ПЦР мазок из зева. Тогда через 2 недели будет отмечаться нарастание IgA.
Отрицательный результат —менее 0,8. При наличии проявлений правильно исследовать мазок из зева на ПЦР. Расшифровка результатов: Положительный результат —более 1,1. IgG выявлены, а это может быть в следующих случаях: - Сформирован иммунитет после давно перенесенной инфекции. Возможно, IgG ещё немного, что требует повторить исследование через 2 недели и возможно, когда: - Инфекция протекает менее 5-6 недель. Антитела IgG при повторном исследовании в таком случае возрастут.
Тогда повторно тест будет отрицательный. IgG не обнаружены.
Методики ПЦР, которую применяют в конкретной лаборатории. ПЦР в реальном времени предназначена для количественных тестов, но ее можно применять и для качественных анализов — правда, получится дороже, а разницы с более дешевым классическим вариантом ПЦР не будет. Количества анализов, которые вы собираетесь сдавать.
Типа анализов. Реактивы для количественных ПЦР-тестов более дорогие, а методика сложнее, так что количественные тесты дороже качественных.
Он также может быть проведен двумя методами: определением количества частиц вируса в крови или методом ПЦР. Данный вариант показан для выявления стадии инфекции, например, перехода острой формы гепатита С в хроническую, а также для контроля эффективности лечения заболевания. Анализ на вирусную нагрузку не заменяет другие необходимые исследования, так как не показывает стадию повреждения печени и тяжесть течения болезни.
Для определения этих показателей необходимы биохимическое исследование крови и биопсия тканей печени. Для данного исследования берут кровь из вены.
Исследование для выявления возбудителя гепатита C HCV , в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени РТ-ПЦР определяется наличие генетического материала РНК вируса и его количество вирусная нагрузка в образце крови.
РНК HCV может быть обнаружена в концентрации, находящейся за нижней границей линейного диапазона концентраций. Линейный диапазон концентраций — это диапазон, в котором можно точно посчитать количество копий возбудителя. Метод исследования Полимеразная цепная реакция с обратной транскрипцией в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования? Венозную кровь. Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.
Он способен размножаться в клетках крови нейтрофилах, моноцитах и макрофагах, В-лимфоцитах и вызывать криоглобулинемию, болезнь Шегрена и В-клеточные лимфопролиферативные заболевания. HCV благодаря высокой мутационной активности способен избегать воздействия защитных механизмов иммунной системы. Существует 6 генотипов и множество субтипов вируса, которые имеют разные значения для прогноза развития заболевания и эффективности противовирусной терапии.
Основной путь передачи инфекции — через кровь препараты для переливания элементов крови и плазмы, донорские органы, нестерильные шприцы, иглы, инструменты для татуирования, пирсинга. Вероятно заражение при половом контакте и ребенка от матери во время родов, но это случается нечасто.
ПЦР-тест и тест на антитела к коронавирусу: как разобраться в результатах?
| Анализы на ВПЧ. Что это такое и как его берут | Роспотребнадзор напоминает о ключевых особенностях тестирования методом ПЦР и отвечает на самые часто задаваемые вопросы. |
| Что такое ПЦР-анализ? | Что такое ПЦР, как работает метод ПЦР в диагностике, преимущества методики, показания, подготовка к проведению ПЦР-анализа, как проводится ПЦР-анализ, что показывают результата теста. |
Подготовка к исследованию
- Результаты ПЦР диагностики
- Как сдать кровь на ПЦР
- Результаты ПЦР
- О рекомендациях, как подготовиться к сдаче ПЦР-теста на COVID-19
- ПЦР - что это такое?
Риск получения ошибочного результата
- Показания к исследованию
- Принцип метода
- 12 методов в картинках: полимеразная цепная реакция
- Результаты ПЦР: расшифровка и интерпретация.
Анализ ПЦР на гепатит С
Определение «сомнительный» является общепринятым лабораторным термином. В таком случае, с целью получения более определенного заключения либо отрицательного, либо положительного необходим, через некоторый промежуток времени, повторный забор и повторение процедуры, а значит необходимы расход реактивов и затрата рабочего времени медицинского персонала. Если и в этом случае значение остается сомнительным, то тогда прибегают к применению альтернативных, дополнительных методов исследования. Таким образом, «сомнительный» итог как и любой другой является следствием объективных причин: биологических процессов, происходящих в организме пациента. В отличии от антител IgG этот анализ не покажет, болели ли Вы ранее. Он покажет только наличие вируса к моменту исследования.
ПРЦ определяет наличие всего 10—100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103—105. Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы. Скорость получения результатов. Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4—5 часов. Диагностика латентных инфекций. ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме. Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания. Ограничения метода Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода: Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма. При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени 1—2 месяца , за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме. Возможность возникновения перекрестной реакции. Подбор фрагментов ДНК праймеров осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма. Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа. Изменчивость микроорганизмов. Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа. Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя. Забор биоматериала. Процедура, предшествующая непосредственному анализу, которая осуществляется в процедурном кабинете соответствующего профиля. Забор делается с помощью стерильного оборудования только в стерильные пробирки. Материалом для исследования могут быть: Эпителиальные соскобы со слизистых оболочек: из уретры, из цервикального канала, со слизистой дыхательных путей и зева, из конъюнктивы. Забор проводится с помощью специального ершика, при этом недопустимо попадание в материал следов крови. Собираются первые 50 г утренней мочи в стерильную емкость. Материал используется для диагностики мочеполовых инфекций. Используется для ПЦР-диагностики туберкулеза и респираторных форм микоплазмоза и хламидиоза.
При этом всю эту хитро упакованную многометровую махину ДНК надо аккуратно скопипастить так, чтобы две дочерние клетки получили максимально точную копию оригинала. Вот тут-то и пригодилась двойная спираль - специальные белки в нужный момент расцепляют цепи, и на основании каждой цепи достраивается ее комплементарная копия. Отвечает за это фермент под названием полимераза. Она ползет по старой одиночной цепи ДНК и вставляет в новую цепь буквы, комплементарные старой. Видит А - вставляет Т, видит G - C, ну вы поняли. Чтобы полимераза могла сесть на одиночную цепь ДНК и начать свое дело, ей нужна затравка - это уже готовый маленький кусочек второй цепи, сидящий на первой. Его еще называют праймер. В клетках его делает специальный фермент праймаза, да и вообще там на самом деле жесть все как сложно, но об этом в другой раз. Адская схема репликации. Все, что надо понять - была одна двойная спираль, а стали две, и помогли им в этом, помимо все прочего, праймеры и полимераза. Так или иначе, в итоге вся ДНК в клетке удваивается, и вот теперь клетка может спокойно делиться. Прочитали до сюда? Вот теперь можем переходить непосредственно к ПЦР. Ученые уже десятилетия изучают свойства ДНК. Выделяют из живых организмов, синтезируют искусственно... Потому что когда его мало, то труднее ставить эксперименты - проще запороть, загрязнить чем-то чужеродным и т. И тогда в далеком 1983м один любящий галлюциногены ученый Кэри Муллис решил использовать для этого то, что давно уже придумала природа - репликацию, только искусственную, в пробирке. Нобелевку по химии за это получил, кстати... За основу взяли все основное, что есть в "натуральной" репликации - собственно ДНК, полимеразу, свободные буквы-нуклеотиды, чтобы ей было что вставлять в новую цепь, и праймеры - затравку, которая покажет полимеразе, откуда ей начать свое грязное дело. Путем долгих манипуляций и экспериментов выяснилось, что оптимальнее всего смешать все это и поставить на определенный температурный режим, где каждый этап реакции будет происходить на своей заданной температуре.
В группе вирусов с низким риском — 6, 11, 42, 44, 43. Полученные результаты не дифференцируются по штаммам. Ошибки при нахождении штамма практически исключены. Концентрация обозначается в других единицах, нежели в анализе ПЦР — не в геном-эквивалентах, а в относительных единицах они отражают отношение количества копий вируса к значению, которое считается пороговым. Положительным считается результат, превышающий 1 относительную единицу. В отличие от ПЦР-анализа, ответы Digene-теста клиники готовят в течение 10 дней. Если получен результат ниже количественно значимого порога, будет выдан ответ «не обнаружено». Поэтому результаты дайджен-теста и качественного ПЦР-анализа, в котором даже минимальное количество вируса считается положительным результатом, могут быть противоположными. Врачи рекомендуют проходить digene-тест, поскольку при прочих равных он выгоднее в финансовом плане — после получения результатов не придется отдельно проводить количественный анализ. Подготовка к анализам Как уже говорилось, и в ПЦР-анализе, и в дайджин-тесте используется генетический материал. Для его получения необходимо выполнить забор клеток эпителия из урогенитального тракта. Обычно у женщин берут соскоб из цервикального канала, у мужчин — из уретры. Иногда используется материал из прямой кишки, полости рта — при наличии там новообразований. В отличие от многих других ПЦР-анализов, при исследовании ВПЧ не используют кровь, поскольку вирус в ней практически не обнаруживается. Рекомендации для женщин: Чтобы получить достоверные результаты, женщине рекомендуют сдавать анализ не раньше чем через 5 дней после начала менструального цикла и не позже чем за пять дней до его окончания. Первым днем цикла считается первый день менструации. Оптимальное время сдачи анализа — первая половина цикла; За сутки до проведения исследования и в тот же день исключаются интимные контакты, спринцевания, использование интравагинальных лекарственных и контрацептивных средств; УЗИ органов малого таза с использованием интравагинального датчика, кольпоскопию и соскоб разносят во времени на 3-4 дня. Рекомендации для мужчин: не мочиться за 2-3 часа до соскоба из уретры; отказаться от интимных контактов за 2 суток; общие рекомендации: закончить прием антибиотиков перорально или в виде инъекций за месяц до обследования; прекратить лечение с помощью местных антибактериальных или антисептических средств за 2 недели до обследования; в день обследования не мыть половые органы с использованием антибактериального мыла или геля. Все это относится к плановой сдаче анализов, но если при обращении к врачу обнаружены патологические изменения, соскоб берут сразу же, без подготовки. Процедура забора материала У женщин клетки эпителия берут на гинекологическом кресле с помощью одноразовой цитологической щеточки, которую вводят в цервикальный канал на 1-1,5 см, несколько раз прокручивают вокруг оси, затем аккуратно вынимают так, чтобы не загрязнить материал вагинальными выделениями. Это безболезненная и быстрая процедура. Мужчине в уретру вводят специальный зонд, всего на 3-4 см, так что болевых ощущений тоже не будет. Затем зонд или щеточку опускают в пробирку с жидкостью, прополаскивают, отжимают о стенки, вынимают. Пробирку закупоривают и отправляют в лабораторию. Стоимость забора материала в клиниках в среднем составляет 400 руб. Эту сумму прибавляют к сумме за само исследование. Сроки проведения анализов Первично анализ на ВПЧ рекомендуется сдать в следующих ситуациях: при плановом гинекологическом осмотре женщины старше 30 лет если результата будет отрицательным, анализ рекомендуется сдавать каждые три года ; при получении сомнительного цитологического мазка ПАП-теста ; после обнаружения на осмотре остроконечных кондилом, диспластических изменений шейки матки. Если у женщины старше 30 лет анализ на онкогенный штамм ВПЧ положительный, это может означать, что инфекция персистирует, и иммунитет не может уничтожить возбудителя. До этого возраста опасность невелика — обычно повторные анализы оказываются «чистыми». Когда наряду с положительным анализом присутствуют изменения в цитологическом мазке, это значит, что риск развития онкологической патологии высок. В этом случае рекомендуется пройти расширенную кольпоскопию с биопсией шейки матки. Одновременно назначается противовирусная терапия. Повторные анализы рекомендуется сдавать в той же лаборатории, где и первичный. Так удобнее сравнивать результаты. Перед беременностью анализ на ВПЧ необязателен.
ПЦР-15 - 93.570
Чтобы диагностировать присутствие вируса в организме, сначала появились тесты ПЦР – полимеразной цепной реакции. Статья автора «РИА Новости» в Дзене: ПЦР-тест — основной метод обнаружения коронавирусной инфекции. ПЦР-тест или полимеразная цепная реакция – метод молекулярно-генетического исследования, указывающий на наличие или отсутствие инфекции в организме больного. ПЦР — это полимеразная цепная реакция. Анализ ПЦР на HCV, виды: отрицательный, положительный и расшифровка.