medium ПЦР (Полимеразная цепная реакция) Если попытаться описать ПЦР-диагностику в трёх словах, то это, совершенно определённо, будут слова ТОЧНО, НАДЁЖНО, БЫСТРО.
Что такое анализ ПЦР?
Положительный результат ПЦР-тестирования позволяет своевременно выявить заболевание, назначить нужное лечение и добиться изоляции пациента, что сохранит других людей от риска заражения. ПЦР тестирование. Полимеразная цепная реакция — это технология, позволяющая выделить из двойной спирали ДНК участок с конкретным геном, размножить его и изучить. ПЦР тестирование. Полимеразная цепная реакция — это технология, позволяющая выделить из двойной спирали ДНК участок с конкретным геном, размножить его и изучить. ПЦР или, иначе, полимеразная цепная реакция – это современный высокоинформативный метод молекулярно-генетической диагностики, активно применяемый для выявления у человека различных инфекционных и наследственных заболеваний.
Что такое анализ крови на ПЦР, и зачем он нужен
Подготовка к ПЦР-анализу мокроты За 2 недели до исследования по согласованию с лечащим врачом следует прекратить приём противомикробных препаратов и иммуномодуляторов. Мокроту следует собирать утром, сразу после пробуждения. Предварительно нужно почистить зубы и прополоскать рот, нельзя есть до взятия биоматериала. Важно собирать не слюну или носоглоточную слизь, а мокроту.
Сделайте несколько глубоких вдохов, чтобы вызвать «мокрый» кашель. Необходимо откашлять содержимое глубоких дыхательных путей. Сплюньте мокроту в заранее подготовленный стерильный контейнер с плотно закрывающейся крышкой.
Минимальный объём мокроты — 1 мл. Доставьте контейнер в лабораторное отделение в день взятия биоматериала. Подготовка к соскобу из зева За 24 часа до исследования по предварительному согласованию с лечащим врачом следует отказаться от терапии полости рта какими-либо лекарственными препаратами.
Подготовка к соскобу из влагалища или урогенитального тракта За 30 дней до исследования следует прекратить применение антибиотиков по согласованию с лечащим врачом. За 24 часа до исследования не следует проводить спринцевание, внутривагинальную терапию свечи, тампоны , не использовать антисептические средства в том числе мирамистин , исключить половой контакт. В день исследования запрещается проводить туалет половых органов.
Показанием к молекулярной диагностике методом ПЦР в урологии и гинекологии является: воспаление шейки матки, простаты, уретры, органов малого таза; бесплодие у мужчин и женщин; эректильные нарушения. Анализ на скрытые инфекции требуется после незащищенного полового акта с постоянным при наличии симптомов ЗППП или незнакомым партнером, на этапе подготовки к беременности , а также по окончанию лечения половых инфекций. Вирусы, как ВПЧ или генитальный герпес не поддаются лечению. Бактериальные и грибковые инфекции излечимы. Чтобы обнаружить скрытое присутствие вируса герпеса в крови, необходимо сдать анализ на антитела IgG. Противопоказания Соскоб ПЦР не берут во время месячных. Альтернативой может стать анализ крови. Также исследование не проводят во время местной или общей антибактериальной терапии.
Подготовка к ПЦР При взятии крови достаточно не употреблять утром пищу. Исследование проводится натощак. Анализ ПЦР урогенитального мазка предполагает соблюдение следующих рекомендаций: в течение 2-3 дней воздержаться от половой жизни, не спринцеваться, не пользоваться вагинальными препаратами и тампонами, средствами для интимной гигиены с антисептическим действием; после трансвагинального УЗИ, кольпоскопии или биопсии должно пройти не менее 2 дней; в день исследования подмыться теплой водой без применения моющих средств.
Исследуемые после болезни IgG — это антитела к так называемому N-белку коронавируса исследуется в большинстве лабораторий. До 6 рабочих дней Доступно с выездом на дом 1 090 руб В корзину Этот анализ выявляет наличие или отсутствие антител. При повторном выполнении количественного анализа можно оценивать устойчивость иммунного ответа по динамике уровня этих антител. Тест на антитела к N-белку не информативен для оценки поствакцинального иммунитета. Объем сроки и кратность исследований при новой коронавирусной болезни COVID-19 Объем, сроки и кратность лабораторных исследований зависят от степени тяжести заболевания. Легкое течение заболевания с наблюдением пациента в амбулаторных условиях, как правило, не требует дополнительных лабораторных исследований.
В случае среднетяжелого и тяжелого течения выполняются следующие исследования: Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоформула, СОЭ. Краткое описание исс... До 1 рабочего дня Доступно с выездом на дом 385 руб.
Казахстанцы делятся сообщением о том, что ПЦР-тесты были созданы для определения вирусов, вызывающих простуду. Поэтому генетический материал разных патогенов может якобы дать ложноположительный результат при исследовании на коронавирус. Это неправда, сообщает Vecher. Несмотря на то что COVID-19 может вызвать симптомы, схожие с простудой, эти заболевания вызваны разными вирусами.
О видах исследований на новую коронавирусную инфекцию COVID-19
анализ ПЦР положительный Положительный анализ ПЦР (полимеразной цепной реакции) обозначает, что в изученном материале была обнаружена инфекция, которую искали. Если его результат положительный, то этот результат верный. «Если экспресс-тест показал положительный результат, а ПЦР-тест — отрицательный, такое может быть, потому что вирусы не сидят и не ждут. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — высокоточный метод диагностики заболеваний, основанный на копировании ДНК или РНК патогена в пробе. Содержание. В случае получения в лаборатории положительного теста результат выдается как «первично положительный», а биоматериал передается для проведения подтверждающего теста в референсный центр Роспотребнадзора. Поэтому определить, заразен ли человек при получении положительного результата ПЦР, не представляется возможным. Это касается не только ПЦР-теста на SARS-CoV-2, но и на другие инфекции.
ПЦР-диагностика
Преимущества ПЦР-диагностики Хотя ПЦР-диагностика и является относительно «молодым» методом, широкое распространение в медицинской практике она получила благодаря явным преимуществам перед другими способами анализа: Прямое определение возбудителя инфекции. Некоторые традиционные методы, такие как иммуноферментный анализ ИФА , выделяют только белки-маркеры, которые являются продуктом жизнедеятельности возбудителей инфекции, а потому только косвенно указывают на присутствие микроорганизмов. Наличие специфического участка в ДНК, выявленное с помощью ПЦР, безошибочно или почти безошибочно указывает на присутствие конкретной инфекции. Высокая специфичность метода. Она обусловлена тем, что в исследуемом материале выявляется фрагмент ДНК, характерный только для конкретного возбудителя инфекции. Специфичность исключает возможность ложных результатов анализа, тогда как в иммунологических методах исследований ошибки вполне вероятны из-за перекрестной реакции антигенов. Высокая чувствительность. При помощи ПЦР-диагностики можно выявить присутствие в организме даже единичных клеток вирусов или бактерий в тех случаях, когда обычными методами сделать это практически невозможно.
ПРЦ определяет наличие всего 10—100 клеток в пробе, тогда как иммунологическими и микроскопическими тестами можно определить наличие инфекции при количестве клеток не менее 103—105. Сходство состава всех ДНК или РНК дает возможность применять универсальные методы лабораторных исследований, диагностируя сразу несколько возбудителей из одной биологической пробы. Скорость получения результатов. Поскольку для проведения ПЦР-диагностики не нужен посев и выделение культуры возбудителя, то и большого количества времени на нее не требуется. Весь цикл — от забора биоматериала до получения результатов — занимает 4—5 часов. Диагностика латентных инфекций. ПЦР-методом диагностируются трудно культивируемые и некультивируемые формы микроорганизмов, встречающиеся в тех случаях, когда заболевание протекает в скрытой форме.
Методом ПЦР можно выявлять возбудителей инфекции не только в организме человека, но и в почве, воде, продуктах питания. Ограничения метода Тем не менее не стоит думать, что ПЦР-диагностика не имеет недостатков. У нее есть свои ограничения, но их количество настолько незначительно, что не может отрицательно повлиять на популярность и эффективность метода: Вероятность амплификации ДНК не только живого, но и погибшего микроорганизма. При проведении ПЦР-диагностики для контроля эффективности лечения необходимо соблюдать определенные требования. В частности, проводить ПЦР нужно после определенного промежутка времени 1—2 месяца , за который происходит полное исчезновение возбудителя инфекции в организме. Возможность возникновения перекрестной реакции. Подбор фрагментов ДНК праймеров осуществляется на основе знаний о генетическом строении конкретного микроорганизма.
Но теоретически такой же фрагмент может присутствовать и у других микроорганизмов, геном которых на сегодняшний день еще не расшифрован. Их присутствие в пробе может привести к ложноположительному результату анализа. Изменчивость микроорганизмов. Эта способность возбудителей к мутации иногда приводит к тому, что некоторые их штаммы становятся неуловимыми в процессе ПЦР-анализа. Чтобы уменьшить риски, разработаны стандарты объемов испытаний тест-систем ПЦР-диагностики, включающие проверку на перекрестные реакции и тестирование всех известных штаммов конкретного возбудителя.
Антитела класса IgM Это первая линия защиты — самый скорый ответ организма.
IgM появляются через 3-7 дней с момента инфицирования. А IgG появляется не ранее, чем через 2 недели. Отсутствие антител к коронавирусу у человека, имевшего контакт с больным, не гарантирует, что он не инфицирован — могло пройти слишком мало времени для выработки антител. Поэтому необходимо повторное исследование через неделю. Если и оно не обнаружит антител, значит пациент не инфицирован вирусом SARS-Cov-2, но и защиты от инфекции в виде антител у него нет. Наличие IgG при отрицательном IgM — свидетельство давнего заражения более месяца или давно перенесенного заболевания возможно, годы назад.
Антитела класса IgА IgА вырабатываются в слизистых оболочках при проникновении через них вируса. По времени появления они совпадают с IgM, то есть вырабатываются в самом начале. Понимая динамику появления разных классов антител в организме, сопоставляя лабораторные данные с эпиданамнезом и клинической картиной, можно: гораздо точнее сортировать острые случаи заболевания от уже переболевших, выявлять возможных скрытых носителей когда симптомы болезни отсутствуют, а в крови выявлены IgM — свидетельство «свежего заражения» , которые могут быть эпидемиологически опасны для других людей, дифференцировать защищённых иммунитетом антителами от беззащитных перед инфекцией, прогнозировать эпидемиологическую ситуацию. Экспресс-тест на антитела Тестирование на антитела в экспресс-формате гораздо быстрее, чем сложная ПЦР-диагностика. Поэтому, например, при пневмонии, экспресс-тест на антитела к SARS-Cov-2 позволяет быстро принять решение врачу о том, как лечить пациента — противовирусными препаратами если антитела к вирусу выявлены или антибиотиками. Экспресс-тесты — скрининговый инструмент для обследования больших масс людей, что позволяет объективно оценивать эпидемиологическую обстановку и реальную опасность в разных регионах, эффективно управлять карантинными мероприятиями.
В конце января правительство России в своем Telegram-канале сообщило, что результаты экспресс-тестов будут доступны на сайте госуслуг. В конце декабря прошлого года глава Роспотребнадзора Анна Попова на неформальной встрече руководителей государств — участников СНГ заявила , что Россия занимает лидирующие места по охвату тестирования на коронавирус. В России продолжается масштабная кампания по вакцинации. Граждане могут привиться бесплатно. Вся актуальная информация по ситуации с коронавирусом доступна на сайтах стопкоронавирус.
Есть также требование — оставлять зонд, которым берется биоматериал, в пробирке. Его полагается отламывать или отрезать ножницами. При выполнении этой операции тоже есть риск испачкать перчатки, поэтому их надо каждый раз менять.
По словам специалиста, загрязнение «чистого» образца может случиться и при транспортировке анализов. В итоге пробирка снаружи будет контаминирована и, если потом пробирки ставятся в один штатив и перчатки не меняются, частицы вируса могут «переноситься» в другой образец. Еще такое бывает, когда в пробирке оставляются достаточно крупные зонды.
В этом случае крышка микропробирки закрывается с усилием, может периодически приоткрываться, а вытекающие капельки биоматериала опять же попадают на стенку пробирки снаружи, — поясняет медик. В лаборатории, кроме регулярной смены перчаток, важно аккуратно открывать пробирки — так, чтобы микроаэрозоль из одной пробирки не попал в другую.
Результаты ПЦР диагностики
ПЦР тест на COVID-19 определяет только фрагмент вирусной РНК, именно поэтому положительный результат теста не означает, что пациент на данный момент заразен. В подтверждение приведем результаты нескольких исследований. Анализ — полимеразная цепная реакция имеет аббревиатуру — ПЦР. Полимеразная цепная реакция (ПЦР, PCR) — это точный метод лабораторной диагностики, который используют для выявления возбудителей инфекционных заболеваний. ПЦР-тест положительный, но симптомов нет.
Результаты ПЦР диагностики
Официальной датой изобретения этого метода диагностики считают 1983 год, а «родителем» - американского биохимика Кэри Муллиса. Он хотел создать метод, благодаря которому можно было бы амплифицировать ДНК увеличивать число её копий в ходе многократных последовательных удвоений исходной молекулы ДНК с помощью фермента ДНК-полимеразы. Это событие стало поистине революционным и оказало в последующем серьёзное влияние на развитие молекулярной биологии, генетики и медицины. Подтверждение этому - Нобелевская премия в области химии, которой был удостоен К. Муллис в 1993 году.
Общую картину по тестированию на COVID-19 также дополняет тот факт, что среди новых заболевших появляются и вакцинированные люди, но они при этом выделяют вирус в меньшем количестве и не такое продолжительное время, констатировала замдиректора Московского научно-исследовательского института эпидемиологии и микробиологии имени Г. Габричевского Татьяна Руженцова. Однако сомнительный или ложный результат может давать любая тестовая система.
Эксперты неоднократно выражали мнение, что ложные результаты на коронавирус связаны связаны как с ошибками медработников, так и пациентов. Иными словами, речь идет о несоблюдении правил и рекомендаций по тестированию. Еще одну версию выдвигал директор Института медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний Сеченовского университета Александр Лукашев. Газете «Известия» он рассказывал, что COVID-19 — специфический вирус в том плане, что его можно не обнаружить в доступном биоматериале.
Для людей с тяжелым течением болезни этот срок продлевают до 20 дней. Если у человека с положительным тестом не было симптомов болезни, то Минздрав США рекомендует в таких случаях прекратить самоизоляцию через 10 дней со дня положительного теста. Для людей с тяжелым иммунодефицитом инфекционист может рассмотреть стратегию тестирования для решения о сроке выхода из самоизоляции, — привела пример Варвара Веретюк.
Но, по ее словам, пока нет в наличии коммерческих тест-систем, которые способны отличить «боеспособный» коронавирус от его фрагментов. Дмитрий Денисов, медицинский директор лабораторной службы «Хеликс», дополняет, что, согласно исследованиям, вирусная РНК может выделяться со слизистых верхних дыхательных путей до 21-го дня с момента появления симптомов или начала активной репликации вируса при бессимптомном течении заболевания, иногда даже более этого срока. А наиболее активно вирус выделяется за 1—3 дня до появления симптомов. Прежде всего необходимо понять, какой именно тест-системой пользовался человек. Доктора рекомендуют перепроверять результаты домашних экспресс-тестов в лабораториях Источник: Александр Ощепков При ситуации, когда положительный результат в течение месяца подтверждается лабораторией, важно понять, есть ли у человека какие-то жалобы и симптомы болезни, добавляет врач. Если симптомы отсутствуют и самочувствие человека не страдает, то, вероятнее всего, этот человек — носитель коронавируса. Ему необходимо минимизировать контакты, носить маску и получить консультацию инфекциониста, — считает Олеся Миропольская.
По ее словам, это зависит от иммунной системы организма и «дозы» вируса, полученной человеком: — Положительный ПЦР часто бывает в течение трех недель, но может держаться и месяц. Иногда у пациента уже прошли клинические симптомы, например, вылечили пневмонию, но вирус остается. Этот человек является вирусовыделителем. Иногда мы таких пациентов выписываем, но предупреждаем, что нужно изолироваться.
Иными словами, речь идет о несоблюдении правил и рекомендаций по тестированию. Еще одну версию выдвигал директор Института медицинской паразитологии, тропических и трансмиссивных заболеваний Сеченовского университета Александр Лукашев. Газете «Известия» он рассказывал, что COVID-19 — специфический вирус в том плане, что его можно не обнаружить в доступном биоматериале. Если другие коронавирусы размножаются в носоглотке и ротоглотке, где их можно легко найти, то SARS-CoV-2 у значительной части больных присутствует только в бронхах. Вместе с этим в ВОЗ подчеркивают, что на результаты тестирования влияет очень много факторов. Это касается и процесса забора материала, и транспортировки, и хранения биоматериалов. Важно и то, правильно ли подготовлен пациент к сдаче анализа и проверена ли тест-система в конкретной лаборатории.